細胞的體外培養(yǎng)檢測產(chǎn)品生物性能

1.實驗?zāi)康模?/strong>

通過細胞的體外培養(yǎng)來檢測產(chǎn)品的生物性能是否達到要求。

2.實驗原理：

體外培養(yǎng)的細胞株要在體外持續(xù)地培養(yǎng)就必須傳代，以便獲得穩(wěn)定的細胞株或得到大量的同種細胞，并維持細胞種的延續(xù)。培養(yǎng)的細胞形成單層匯合以后，由于密度過大生存空間不足而引起營養(yǎng)枯竭，將培養(yǎng)的細胞分散，從容器中取出，以1:2或l:3以上的比率轉(zhuǎn)移到另外的容器中進行培養(yǎng)，即為傳代培養(yǎng)。通過貼壁細胞的傳代培養(yǎng)，觀察細胞的生長狀態(tài)可以反映出培養(yǎng)產(chǎn)品是否達到細胞培養(yǎng)的要求。

3.實驗材料：

3.1 抽檢樣品：

3.2 細胞株：VERO細胞系：*貼壁細胞，主要用于接種病毒的一種細胞。

3.3 實驗試劑：RPMI1640（8111031）、0.25%胰酶（876536）、小牛血清（8187648）、都購自廣州英韋創(chuàng)津生物試劑公司。

3.4 實驗耗材：3ml的巴斯德吸管、酒精燈、鑷子、酒精棉球。

3.5 實驗儀器：XDS-1倒置顯微鏡購自廣州粵顯光學(xué)儀器科技有限公司；

超凈工作臺購自蘇州凈化儀器設(shè)備公司；

4.實驗步驟：

4.1. 在倒置顯微鏡下觀察細胞形態(tài)和密度，取生長良好的細胞若干瓶，棄掉舊培養(yǎng)液。

4.2. 加入胰酶消化細胞，消化適度后倒去胰酶。

4.3. 加入適量培養(yǎng)液反復(fù)吹打數(shù)次。

4.4. 細胞計數(shù)稀釋細胞密度為1×10⁵/ml

4.5. 將細胞接種于抽檢樣品中：

5.實驗結(jié)果：

1、Vero細胞培養(yǎng)24小時后10×10倍下圖片

2、Vero細胞培養(yǎng)48小時后10×10倍下圖片

3、細胞計數(shù)

6.結(jié)果判定

這次抽檢樣品做細胞培養(yǎng)檢測，細胞生長狀態(tài)正常，貼壁生長良好，10%血清培養(yǎng)液培養(yǎng)，細胞增長率符合企業(yè)標(biāo)準(zhǔn)。